Противораковые комплексы металлов

Развита методология капиллярного электрофореза (КЭ) для исследования метаболизма противоопухолевых соединений на основе комплексов металлов. Разработаны базовые методики, позволяющие изучать связывание комплексов металлов с белками крови в модельных физиологических условиях и в реальных биологических объектах, идентифицировать образующиеся белковые формы, оценивать константы их образования и устойчивость во внеклеточной среде, а также устойчивость исходных соединений (в том числе в лекарственной форме) и их относительную липофильность. Предложены два варианта КЭ для измерения скорости взаимодействия комплексов металлов с транспортными белками крови, в которых в качестве методов детектирования используются масс-спектрометрия с индуктивно связанной плазмой (ИСП-МС) или спектрофотометрия. Определены константы скорости связывания комплексов галлия и рутения(III), находящихся в клинических испытаниях, с альбумином и трансферрином. На основании анализа полученных кинетических данных сделано заключение, что доставка соединений в раковую опухоль происходит преимущественно по трансферриновому циклу. Исследованы белковые аддукты разрабатываемого лекарства на основе комплекса рутения(III) с индазольными лигандами в модельной внеклеточной среде. Установлено, что ни аскорбиновая кислота, ни глютатион при концентрациях, соответствующих их содержанию в крови, не восстанавливают рутений до двухвалентного состояния и не изменяют состав аддуктов по лигандообменному механизму. Последний вывод подтвержден посредством ИСП-МС детектирования белковых форм металла. С использованием того же метода детектирования изучен in vitro метаболизм комплекса галлия орального действия (8-оксихинолинат). Найдено, что в условиях, моделирующих среду тонкого кишечника, других химических форм галлия не образуется. Комплекс взаимодействует с белками сыворотки крови, причем сродство к трансферрину заметно выше, чем к альбумину. Идентифицированы три трансферриновых аддукта и предложен механизм их образования. Кинетика образования и равновесное распределение белковых форм комплекса галлия в сыворотке крови в основном отвечает таковым, измеренным при взаимодействии с трансферрином. Это подтверждает, что именно этот белок отвечает за транспорт лекарства по кровотоку и доставку к раковой клетке. Для априорного расчета липофильности разрабатываемых лекарственных соединений предложено использовать электрокинетическую хроматографию (ЭКХ). Показано, что и мицеллярный, и микроэмульсионный варианты ЭКХ могут быть использованы для оценки липофильности с достаточной для скрининговых целей точностью и скоростью. Разработан метод контроля устойчивости 8-оксихинолината галлия в готовой лекарственной форме с помощью мицеллярной ЭКХ.