Способ определения полиморфизма APAF1, ассоциированного с гаплотипом фертильности голштинского скота HH1

Изобретение относится к молекулярной генетике. Описан способ определения полиморфизма генов, ассоциированных с фертильностью крупного рогатого скота, а именно гена апоптотического протеаза-активирующего фактора 1 (APAF1), связанного с гаплотипом фертильности голштинского скота НН1. Способ включает ПЦР-ПДРФ определение полиморфизма C→T в позиции 63150400 (сборка генома UMD 3.1) гена APAF1. При этом амплификацию фрагмента гена, содержащего мутацию, проводят с использованием двух праймеров. В обратный праймер вводится нуклеотидная замена, приводящая к исключению неспецифического сайта рестрикции эндонуклеазы BstC8I, расположенного на расстоянии 10 п.о. «down stream» от места исследуемой мутации, с последующим рестрикционным гидролизом продуктов ПЦР эндонуклеазой BstC8I. Фрагменты меньшей длины, образующиеся в результате рестрикции, соответствуют аллелю Q, в то время как нерестрицированный фрагмент большей длины соответствует аллелю X. Идентификация генотипов животных осуществляется по результатам электрофореза продуктов ПЦР-ПДРФ в агарозном геле. Способ может быть использован в генетике сельскохозяйственных животных для выявления полиморфизма в гене APAF1 крупного рогатого скота, ассоциированном с гаплотипом фертильности НН1, с целью последующего использования полученных результатов в популяционной генетике, разведении и селекции крупного рогатого скота.